背景[1-3]
2,4-二氯氧基（2,4-D）是用于控制阔叶杂草的常见内吸性除草剂。它是世界上使用广泛的除草剂，在北美使用次数多的是第三种。2,4-D也是重要的合成植物生长素，通常用于实验室进行植物研究，并作为植物细胞培养基（例如MS培养基）的补充。2,4-D是合成植物生长素，是一类植物生长调节剂。它通过叶子吸收，并转移到植物的分生组织中。随之而来的是不受控制的，不可持续的生长，导致茎卷曲，叶片枯萎并终导致植物死亡。2,4-D通常以胺盐的形式使用，但也存在更有效的酯版本。2，4-D在低浓度（10一50ppm）下，有防止落花落果、提高座果率、促进果实生长、提早成熟、增加产量的作用。
应用[4][5]
用于2,4-二氯氧免疫学快速检测技术研究
2,4-二氯氧(2,4-D)是一种常用的植物生长调节剂和除草剂,并被广泛用于水果品质的提高及保鲜时间的延长,但由于其不易降解造成了在自然界的大量残留,对我们的生态环境和人体健康造成了严重的危害。2,4-二氯氧可以通过皮肤和呼吸系统进入体内,具有潜在的致癌性及致突变性,能刺激人体分泌大量的雌性激素,干扰内分泌系统,对生殖和免疫系统可产生不良的影响。除此之外,2,4-二氯氧还能使血红细胞聚集,阻碍红细胞的携氧能力,损伤肌肉、肝脏、肾脏和脑组织,还会对我们的眼睛、皮肤和粘膜有损害。
制备出人工抗原2,4-D-BSA和2,4-D-OVA,并用2,4-二氯氧人工免疫抗原免疫BALB/c纯系小鼠,得到特异性的多克隆抗体,并运用杂交瘤细胞技术制备了单克隆抗体,组装了2,4-二氯氧间接竞争ELISA试剂盒并对其性能进行了评价。主要研究内容与结果如下：1.2,4-二氯氧人工抗原的制备及鉴定采用碳化二亚胺法(EDC法)将2,4-二氯氧与牛血清白蛋白(BSA)及卵清蛋白(OVA)偶联,合成免疫原2,4-D-BSA和包被原2,4-D-OVA,采用紫外扫描(UV)和聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法进行鉴定；用2,4-二氯氧人工免疫抗原(2,4-D-BSA)免疫BALB/c纯系小鼠,通过间接ELISA测定小鼠多抗血清效价、阻断ELISA鉴定其抑制。
结果表明：BSA与2,4-二氯氧偶联后,波峰出现右移,表明偶联成功；SDS-PAGE电泳中BSA的泳动速度大于2,4-D-BSA表明2,4-二氯氧已与BSA成功偶联；6只小鼠血清效价均达到了1：1.28×104,且1号小鼠多抗血清敏感性好,半数抑制IC50为72.48ng/mL,表明成功获得了高效价、特异性好、亲和力较高的鼠源抗2,4-二氯氧多克隆抗体血清,为2,4-二氯氧残留免疫学检测方法的建立奠定了良好的基础。
参考文献
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[4]Development of an immunochromatographic lateral flow test strip for detection ofβ-adrenergic agonist Clenbuterol residues[J].G.P.Zhang,X.N.Wang,J.F.Yang,Y.Y.Yang,G.X.Xing,Q.M.Li,D.Zhao,S.J.Chai,J.Q.Guo.Journal of Immunological Methods.2006(1)
[5]龚芳.2,4-二氯氧免疫学快速检测技术研究[D].河南工业大学,2013.
