背景及概述[1][2]
二丁酯又叫邻二甲酸二丁酯（Dibutylphthalate，DBP），是一种优良的增塑剂，由于其相对价廉且加工性好，在国内外使用非常广泛。二丁酯对于多种树脂具有很好的溶解能力，具有色泽浅、电性能好、挥发性低、气味小和耐低温等特点。二丁酯是硝化纤维、醋酸纤维、聚氯乙烯等的理想增塑剂，具有良好的软化作用和优良的稳定性、粘着性、耐挠曲性和防水性。此外，二丁酯也用于制造油漆、胶粘剂、人造纤维、印刷油墨、安全玻璃、染料、杀虫剂、香料的溶剂和织物润滑剂等化工产品。
二丁酯能引起中枢神经和周围神经系统的功能性变化，然后进一步引起它们组织上的改变；有趋肝性，可引起轻度致敏作用，具有中等程度的蓄积作用和轻度刺激作用，是一种可疑的内分泌干扰素。目前美国、欧盟等多国都明确禁止或限制使用二丁酯，我国也鼓励使用其他化学品替换有毒有害的二丁酯添加在日化用品中。
检测[1]
CN201310185247.0提供一种二丁酯检测试剂盒和一种二丁酯检测试剂盒的制备和使用方法，该试剂盒在检测二丁酯时可一次连续检测多个样品，具有便捷，快速，灵敏、成本低的特点。检测试剂盒主要包括：
1）包被二丁酯特异性抗原的酶标板：所述酶标板的每个微孔内二丁酯特异性抗原的浓度为1‑5μg/mL；
2）二丁酯单克隆抗体工作液：该二丁酯单克隆抗体工作液的浓度为1‑5μg/mL；
上述二丁酯检测试剂盒的制备方法，主要包括以下步骤：
1）制备二丁酯特异性抗原
将邻二甲酸与2‑乙基己醇混合于环己烷中，加入浓作为催化剂，回流反应，制得2‑（2‑乙基己酯）甲酸；将上述2‑（2‑乙基己酯）甲酸与2‑乙基‑6叔丁氧酰胺丙醇混合于环己烷中，加入浓，回流反应，制得二丁酯被叔丁氧酰胺基胺化产物；随后将上述中间产物加入三氟中，回流反应，脱去叔丁氧酰基的保护，裸露出胺基，制得能够与蛋白质偶联的氨基二丁酯的半抗原；在N‑羟基丁二酰胺和碳二亚胺的催化下，再与载体蛋白偶联，制得二丁酯特异性抗原；所述的载体蛋白为牛血清白蛋白、卵清蛋白、兔血清白蛋白或甲状腺球蛋白；
2）包被酶标板
将上述二丁酯特异性抗原包被于酶标板中，所述酶标板的每个微孔内二丁酯特异性抗原的浓度为1‑5μg/mL；
3）动物免疫
以步骤1）中合成的二丁酯特异性抗原为免疫原免疫小鼠，取免疫小鼠的血清，检测该血清抗二丁酯的效价和抑制价，选取效价和抑制价高的免疫小鼠；
4）细胞融合与筛选
取步骤3）所得免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行细胞融合；采用有限稀释法筛选杂交瘤细胞，得到完全同质的单克隆抗体和稳定的单克隆杂交瘤细胞株，并取不完全佐剂腹腔注射进行致敏后的小鼠，将杂交瘤细胞混悬液注射到小鼠腹腔中，收集腹水，经辛酸‑铵沉淀法进行腹水纯化，得到纯化的二丁酯单克隆抗体；制备浓度为1‑5μg/mL的二丁酯单克隆抗体工作液。
上述二丁酯检测试剂盒的使用方法，主要包括以下步骤：
1）样品前处理
准确称取涂料样品，有机溶剂溶解后，用水稀释至样品重量：溶液体积比为1：106，例如：1g样品终稀释至1000L，0.1g样品终稀释至100L，定容，超声提取10‑30min，得到样品检测液；
2）检测
用上述的试剂盒进行检测，向包被有二丁酯特异性抗原的酶标板中加入标准品或样品检测液，再加入二丁酯单克隆抗体工作液，温育后洗板，加入酶标二抗工作液进行酶活性的放大，再次洗板，加入显色液、终止液，酶标仪测定OD值；
3）结果分析
以抑制率I%为纵坐标，以二丁酯浓度的对数lg[二丁酯(μg/L)]为横坐标，绘制二丁酯竞争抑制曲线；将样品的抑制率代入标准曲线回归方程，从标准曲线上读出样品所对应的浓度，乘以其对应的稀释倍数即为样品中二丁酯的实际含量。
废水处理[2]
CN201410225022.8公开了一种含高浓度二丁酯有机废水的处理方法。本发明所述的含高浓度二丁酯有机废水的处理方法，先调节pH至碱性，充分搅拌，使其分为上层富含二丁酯的油相和下层含二丁酯以及其他有机物的水相溶液，分离上层油相回收二丁酯，下层水相溶液利用过氧化氢-湿式氧化的方法进行氧化处理，处理后的下层水相溶液其COD去除率为65~80%，二丁酯的质量含量降为0.01~0.55%，可达到无害化处理。本发明所述的含高浓度二丁酯有机废水的处理方法，充分实现了资源回收，降低了处理废水所需要的能耗。
提取方法[3]
CN201710367720.5提供一种从海洋球石藻中提取二丁酯的方法，旨在通过薄层层析法、硅胶柱层析法、凝胶柱层析法、制备型薄层PTLC等方法对海洋球石藻相提取物的二丁酯进行分离、纯化，以便于后续大规模化生产二丁酯。
提取二丁酯的方法具体包括以下步骤：
步骤一、制备海洋球石藻相萃取物：先用乙醇溶液浸提，获得乙醇浸膏，再以为萃取剂进行萃取处理，合并萃取液，减压浓缩得到海洋球石藻相萃取物；
海洋球石藻生长至稳定期，收获，冷冻干燥获得海洋球石藻藻粉19.3740g，用质量分数为75％的乙醇浸提，获得乙醇浸膏5.1247g，加入等体积的和水，反复萃取，收集相，合并、减压浓缩至干，获得海洋球石藻相萃取物4.2357g；
步骤二、反相硅胶柱层析制备二丁酯一次粗品：将获得的海洋球石藻相萃取物以反相硅胶柱进行层析处理，收集，检测、合并、减压浓缩至干，得到二丁酯一次粗品；
将4.2357g海洋球石藻相萃取物用适量的分析纯甲醇溶解后，进行反相硅胶(180g)柱层析；依次用水，质量分数为25％的甲醇溶液，质量分数为50％的甲醇溶液，质量分数为75％的甲醇溶液，甲醇洗脱，每个梯度洗脱1.5L，流速控制为30mL/min，每200mL收集1管，旋蒸，初步用TLC分析流出物，合并棕榈酸高浓度流分段，减压浓缩至干，获得二丁酯一次粗品；
步骤三、葡聚糖凝胶柱SephadexLH-20层析制备二丁酯二次粗品：将二丁酯一次粗品以葡聚糖凝胶柱SephadexLH-20进行层析处理，收集，检测、合并、减压浓缩至干，得到二丁酯二次粗品；
将海洋球石藻相萃取物一次粗品用适量甲醇溶解后，上葡聚糖凝胶柱SephadexLH-20，用甲醇作为洗脱剂进行洗脱，流速控制12-13S/drop，使用自动收集器收集各馏分，每30min收集一管，初步用TLC分析流出物，合并80至90管的馏分，减压浓缩至干，获得二丁酯二次粗品；
步骤四、反相硅胶柱层析制备二丁酯一次精品：将获得的二丁酯二次粗品以反相硅胶柱进行层析处理，收集，检测、合并、减压浓缩至干，得到二丁酯一次精品；
将二丁酯二次粗品，依次采用质量分数为30％，40％，50％，60％，70％的甲醇水梯度洗脱，后用甲醇洗脱进行反相硅胶柱层析，每个梯度洗脱300mL，流速控制为5mL/min，旋蒸，初步用TLC分析流出物，合并二丁酯高浓度流分段，减压浓缩至干，获得二丁酯一次精品；
步骤五、正相硅胶柱层析制备二丁酯二次精品：将获得的二丁酯一次精品以正相硅胶柱进行层析处理，收集，检测、合并、减压浓缩至干，得到二丁酯二次精品；
将二丁酯一次精品经过正相硅胶柱层析，用硅胶粉拌样，硅胶用石油醚饱和后装柱，样品上柱后用石油醚和丙酮体系进行洗脱，石油醚和丙酮的体积比为200：1，收集馏分，减压浓缩至干，获得二丁酯二次精品；
步骤六、PTLC制备二丁酯纯品：将获得的二丁酯二次精品进行PTLC，点样、展开，刮板，样品回收，保存于-20℃，得到二丁酯纯品；
将二丁酯二次精品经过PTLC，终得到二丁酯：采用高效薄层层析板，在体积比为：石油醚：＝80：1的展开剂中展开，前后两端显色，用刀片刮取中间部分，合并，用甲醇溶解，高速离心，收集上清液，减压浓缩至干，终得到二丁酯。
主要参考资料
[1][中国发明,中国发明授权]CN201310185247.0邻二甲酸二丁酯检测试剂盒及其制备和使用方法
[2]CN201410225022.8一种含高浓度邻二甲酸二丁酯有机废水的处理方法
[3][中国发明]CN201710367720.5一种从海洋球石藻中提取邻二甲酸二丁酯的方法
